Efecto del óxido nítrico sobre el receptor del factor de crecimiento epidérmico en células normales y tumorales del sistema nervioso central

Résumé

El óxido nítrico (NO) es un mensajero intercelular con múltiples funciones en el sistema nervioso. Entre ellas, se ha descrito que el No es antiproliferativo en diversos tipos celulares. En el cerebro adulto de mamíferos existe formación de nuevas neuronas a paritr de neuroblastos, que se encuentran principalmente en 2 zonas, hipocampo y zona subventricular (SVZ). No se conocen los mecanismos que regulan la neurogénesis del cerebro adulto, pero se sabe que, en la SVZ, los neuroblastos aumentan su proliferación en respuesta al factor de crecimiento epidémico (EGF). Resultados previos obtenidos en nuestro laboratorio mostraban que, en fibroblastos de ratón EGFR-T17 que sobreexprean en su membrana el receptor de EGF (EGFR) humano, el NO era capaz de inhibir este receptor por un mecanismo independiente de cGMP. Por tanto, hemos establecido la hipótesis de que en los neuroblastos de la SVZ, el NO actúa como regulador negativo de la proliferación a través de su interacción con el EGFR. Para demostrarlo, hemos empleado la línea celular de neuroblastoma humano NB69 como modelo experimental. Las células NB69, al igual que los neuroblastos de la SVZ, expresan beta-III-tubulina y otras proteínas marcadoras de neuronas, y poseen en su membrana el EGFR. En presencia de EGF, las células NB69 aumentaron su proliferación un 200% aproximadamente con respecto a células control, cultivadas en ausencia de factores de crecimiento; el mayor índice de mitosis se obtuvo con un medio de cultivo suplementado con suero al 15%. Los donantes de NO SNAP, DEA-NO y DETA-NO inhibieron la proliferación de las células NB69 de forma dependiente de la concentración utilizada, y por mecanismos independientes de cGMP. No obstante, las células cultivadas en presencia de EGF eran más sensibles al efecto citostático del NO que aquellas cultivadas con suero o sin factores de crecimiento. Al analizar, mediante Western blotting, el grado de activación del EG