Terapia génica no viral en modelos animales de esclerosis lateral amiotrófica

Resumen

En el presente trabajo de investigación se ha realizado un ensayo preclínico en el modelo animal murino SOD1G93A para la enfermedad humana de esclerosis lateral amiotrófica (ELA). La estrategia ha consistido en determinar si la aplicación intramuscular de DNA desnudo que codifica para el fragmento C de la toxina tetánica (TTC) en solitario o fusionado a factores neurotróficos ralentiza o mejora el desarrollo de la enfermedad. Antes del inicio de las pruebas terapéuticas se llevó a cabo la caracterización del modelo animal. Dicha caracterización fue realizada, en primer lugar, para el comportamiento motor de los animales, observando que los síntomas se manifiestan más precozmente en machos que en hembras. Posteriormente, la estabilidad de los genes y las proteínas normalizadoras más comúnmente utilizadas para la valoración de niveles de expresión fue estudiada en músculo, médula y cerebro a lo largo de la progresión de la enfermedad. Los resultados mostraron que entre animales de la misma edad no se observa una variación elevada en ninguna de las proteínas estudiadas. Sin embargo, la elección de los normalizadores es crítica si el estudio va a consistir en la comparación de animales de distintas edades. E] primer tratamiento consistió en la inyección intramuscular del plásmido codificante para TTC en solitario. Dicho tratamiento redujo significativamente el comienzo de los síntomas y los déficits funcionales, mejoró la supervivencia de las motoneuronas espinales y prolongó la vida media de estos animales. Además, el análisis bioquímico de la médula espinal reveló la participación de TTC en la inhibición de las vías de señalización apoptóticas y en la activación de señales de supervivencia. Resultados similares fueron obtenidos cuando se aplicó el DNA desnudo que codifica para la fusión de dicho fragmento y el factor neurotrófico derivado de células gliales (GDNF-TTC), así como la fusión de TTC y el factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF-TTC). No obstante, las vías de señalización activadas por cada una de ellas no fueron idénticas. Asimismo, la aplicación del vector de DNA desnudo que codifica para el factor neurotrófico GDNF en solitario también mostró un efecto beneficioso sobre la enfermedad. Los resultados obtenidos indican que la terapia génica no viral basada en la inyección intramuscular de DNA desnudo, que codifica para el fragmento TTC, GDNF o las fusiones genéticas BDNF-TTC y GDNF-TTC, puede ser utilizada como una estrategia terapéutica para la ELA.