Estudio de las proteínas presentes en los gránulos de polifosfato de las células de mieloma

Resumen

El polifosfato inorgánico (polyP) es un polímero lineal que posee desde 3 hasta cientos residuos de ortofosfato unido por enlaces fosfoanhidro de alta energía. Se acumula en los gránulos densos de las plaquetas y está implicado en la coagulación sanguínea, angiogénesis y apoptosis de células plasmáticas. En este trabajo, estudiamos el polyP en las células de mieloma; causantes de la enfermedad del Mieloma Múltiple (MM), segundo cáncer más frecuente de la sangre. Desarrollamos un método para detectar niveles de polyP en poblaciones celulares usando citometría de flujo. También estudiamos su localización y características, mediante experimentos de microscopía confocal, ensayos enzimáticos y técnicas de proteómica. Encontramos que las células de mieloma presentan unos niveles más altos de polifosfato intracelular en comparación con las células plasmáticas normales y otras poblaciones de linfocitos B. Los experimentos de localización y de proteómica de fracciones subcelulares enriquecidas en polyP, indican que este polímero se acumula en mayor medida en el nucleolo de las células de mieloma humano. Al inhibir la transcripción nucleolar, mediante el tratamiento con Actinomicina D, observamos una drástica modificación en la distribución celular del polyP. Además, determinamos que la actividad de la enzima RNA polimerasa I, responsable de la transcripción en el nucleolo, es modulada por polyP de forma dosis dependiente. En conjunto, estos resultados sugieren que el metabolismo del polyP puede afectar a la estabilidad y funcionalidad del nucleolo de las células, desencadenando estados patofisiológicos como el cáncer. Por ello, el polyP nucleolar podría ser considerado una diana atractiva para el tratamiento del MM.