Mecanismos genómicos de tolerancia inmunológica mediados por el virus de la hepatitis c

Resumen

La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) es la causa principal de hepatitis crónica, que suele conducir a cirrosis y carcinoma hepático. Se ha demostrado que la alteración de la respuesta inmunologica mediada por el virus es una de las causas del fallo en el tratamiento y la persistencia viral. Resultados previos demuestran que células Jurkat que expresan de forma estable la proteínca Core del Vhc muestran un aumento en la activación del factor de transcripción NFAT, y una actividad alterada del promotor de la IL-2, afectando a rutas intracelulares de señalización de una manera que podria similar la anergia clonal. En el trabajo realizado hemos diseñado vectores lentivirales que expresan la proteína Core para anlizar los eventos que se desarrollan en la fase inicial de la angergia clonal inducida por Core. Demostramos que los genes asociados a anergia inicialmente descritos sobreexpresados por tratamiento con ionomicina en células T de ratón también se encuentran sobreexpresados en células CD4 humanas, inhibidos por tratamiento con cilosporina y posteriormentes demostramos que dichos genes están activados por Core, siendo también dependientes de ciclosporina. Además mostramos que la expresión de Core es suficiente para provocar la translocación al núcleo de NFAT 1 y 2, el primer evento en la activación de NFAT, y demostramos una ralentización del ciclo celular y proliferación debida a la expresión de Core en células JURKAT, sin efecto en los niveles de apoptosis. Utilizando microarrays de genoma completo, hemos identificado nuevos genes sobreexpresado en células jurkat que expresan Core. También demostramos que la expresión de Core en células T CD4 primarias provoca la translocación de NFAT al núcleo, la sobreexpresión de los genes asociados a anergia y una disminución en la rpoducción de IL2 tras una segunda estimulación con ANTI-CD3 + ANTI-CD28. La relevancia de nuestros resultados se corrobora con la demostración de la presencia de VHC en células CD4 de pacientes crónicos.