Clonaje, secuenciacion y expresion de las proteinas hipofisarias hormona del crecimiento y somatolactina del lenguado solea senegalensis

Résumé

La sobreexplotacion de los recursos marinos es un grave problema que atañe tanto a los paises como al ecosistema en general del planeta.La acuicultura es una practica que puede en gran medida paliar estos problemas ya que permite proteger las existencias naturales en el mar y al mismo tiempo suplementar nuestra alimentacion.En los ultimos años se ha potenciado esta industria, considerandose en la actualidad una de las industrias con mas futuro en especial en la zona de la bahia de cadiz.Al avance en este sector han contribuido, por una parte el desarrollo de nuevas tecnologias y por otra la investigacion basica realizada en las especies cultivadas.En este sentido todos los avances conseguidos en aspectos tan importantes como la reproduccion y el crecimiento son primordiales para la mejora del rendimiento. En todos los vertebrados, tanto el crecimiento como la reproduccion estan controlados, en gran medida, por distintos factores hormonales secretados por la hipofisis, como la hormona del crecimiento. Se han construido varias genotecas de expresion en el vector landagt11 a partir del arn total y el arnm aislados de hipofisis de lenguado. Al utilizar arnm se obtuvo una eficiencia de 1,1 x 10 7 recombinantes/gammag de arnm, mientras que al utilizar arn total se obtuvo una eficiencia de 2,75 x 10 6 recombinantes/gammag de arn total. Tras la amplificacion de una de estas genotecas el numero total de ufp obtenidas es 2,33 x 10 9, de los cuales el 66,4% son recombinantes. A partir de estas genotecas se han clonado y secuenciado los adnsc de las proteinas hipofisarias hormona del crecimiento (gh) y hormona somatolactina (sl) de la especie solea senegalensis. Los adnsc de la gh y de la sl del lenguado se han expresado en escherichia coli en el sistema pet7, y se han purificado gh recombinante (rsgh) y sl recombinante (rssl). La rssl se utilizo para producir sueros anti-rssl (absl) altamente especificos, de alto titulo y