Análisis de las alteraciones en las subpoblaciones linfoides b en pacientes con lupus eritematoso sistémico y artritis reumatoide

Resumen

El lupus eritematoso sistémico (LES) y la artritis reumatoide (AR) son dos modelos de enfermedad autoinmune sistémica que cursan con producción de auto-anticuerpos (Ac) específicos, evidenciando defectos en los mecanismos que regulan el mantenimiento de la tolerancia B. La población de células B circulantes en humanos constituye un compartimento heterogéneo que engloba subpoblaciones celulares con características fenotípicas y funcionales distintivas. El marcaje combinado con CD19, CD27 e IgD permite diferenciar 5 subpoblaciones linfoides B por citometría de flujo: linfocitos B naïve (CD19+CD27-IgD+), CD27IgMIgD (CD19+CD27+IgD+), de memoria switched (SW) (CD19+CD27+IgD-), de memoria doble-negativa (DN) (CD19+CD27-IgD-) y células plasmáticas (CP) (CD19+CD27++IgD-). Los resultados aportados por el presente estudio ponen de manifiesto una serie de alteraciones en la distribución de las subpoblaciones linfoides B circulantes en pacientes diagnosticados de LES, observándose un aumento de las subpoblaciones de linfocitos B de memoria DN y de CP, y una disminución de la subpoblación B CD27IgMIgD. En aquellos pacientes en fase activa de la enfermedad se encontraron además un descenso de linfocitos B de memoria SW y un aumento de linfocitos B naïve. Sin embargo, cuando se consideraban separadamente los pacientes en fase de remisión clínica y que, por tanto, no necesitaban tratamiento para controlar la enfermedad, la única alteración que permanecía era la reducción de la subpoblación de linfocitos CD27IgMIgD. Estas células estaban enriquecidas en el idiotipo auto-reactivo 9G4 y mostraron un aumento de expresión de las moléculas de co-activación CD95, CD80 y CD86 y de los receptores de quimiocinas CXCR3 y CXCR4. Los ensayos de migración revelaron una respuesta aumentada a SDF-1¿ en pacientes con LES, mientras que la respuesta a los ligandos de CXCR3 ensayados no difería significativamente de la de los controles sanos. Además, la disminución de dicha subpoblación estaba en relación con la detección de elevados niveles de auto-Ac séricos (ANA, anti-DNAdc y anti-ENA). Por otro lado, en pacientes con AR en fase activa, la disminución de la frecuencia de linfocitos B CD27 IgM IgD circulantes constituía la única alteración detectable con respecto al grupo control. Además, al igual que se había observado en pacientes con LES, esta subpoblación B contenía una mayor frecuencia de células con características de activación, definida por la expresión de CD95, CD80 y CD86 y con mayor expresión de los receptores de quimiocinas CXCR3 y CXCR4. El estudio de la fracción B presente en el líquido sinovial (LS) de los pacientes con AR activa reveló una predominancia significativa de células B de memoria SW y DN con rasgos de activación definidos por la expresión de CD95, CD80, CD86, CD69 y la pérdida de CD24. El análisis comparativo de la expresión de receptores de quimiocinas en linfocitos B de memoria SW y DN circulantes y de LS mostró diferencias notables. Así, se observó una disminución significativa de la frecuencia de linfocitos B positivos para CXCR5 y un aumento de la frecuencia de células portadoras de CCR5 y CXCR4 en el LS de los pacientes con AR estudiados. Finalmente, las CP presentes en el LS de pacientes con AR mostraronn un fenotipo caracterizado por la expresión masiva de CD95, CD138, CD27 y CXCR4, exhibiendo por tanto un fenotipo intermedio entre CP circulante y CP de órgano de depósito final. Estas CP producían Ac IgG anti-CCP (cyclic citrullinated peptides) de forma espontánea in vitro durante más de 7 días, siendo susceptibles a experimentar apoptosis cuando se estimula la vía de CD95/CD95L. Estos datos, junto al hecho de que la producción de CD95L está reducida en la sinovia reumatoidea, indican que este tejido puede ser una zona privilegiada para la supervivencia de las CP secretoras de Ac IgG anti-CCP, un fenómeno que puede conducir a la perpetuación de la lesión.