Caracterizacion cinetica y efecto de los metales pesados cd, pb y cu en las enzimas aspartato y alanina aminotransferasas del molusco bivalvo Ruditapes philippinarum

Resum

Una de las mas rapidas y sensibles respuestas de los organismos marinos por la exposicion a contaminantes es el cambio en determinadas actividades enzimaticas a nivel celular. El objetivo principal de esta tesis es examinar el efecto de los metales pesados sobre las enzimas de transaminacion aspartato aminotransferasa (asat) y alanina aminotransferasa (a1at) del molusco bivalvo ruditapes philippinarum, y evaluar su utilidad como indices de estres subletal. Para ello se efectuo previamente una caracterizacion de ambas enzimas para profundizar en el conocimiento de su comportamiento in vitro antes de pasar a evaluar los efectos in vivo de los metales. Las enzimas asat y a1at de r. Philippinarum presentan un intervalo de ph optimo de actividad comprendido entre 6.8-8.3 y 6.0-7.5, respectivamente. Ambas enzimas muestran un comportamiento cinetico que se ajusta al modelo de michaelis-menten. Los aniones de los acidos dicarboxilicos analogos al 2-oxoglutarato inhiben notablemente la actividad de las enzimas asat y a1at. Los iones hg2+ y cd2+ inhiben in vitro las actividades asat y a1at. La actividad auat es inhibida tambien por los iones pb2+ y zn2+. El analisis cinetico muestra la existencia de diversos tipos de inhibicion que sugieren la posibilidad de union de estos metales a mas de un grupo funcional de ambas enzimas. Los organismos r. Philippinarum muestran una elevada capacidad de acumulacion de cadmio y plomo en sus tejidos, lo que hace muy recomendable su uso como bioindicadores de contaminacion por estos metales en zonas costeras. Estos organismos muestran, sin embargo, cierta capacidad para regular los niveles de cobre. Se analizaron los efectos in vivo de los metales pesados cadmio, plomo y cobre sobre las actividades aspartato y alanina transaminasas, mediante bioensayos de exposicion subletal en flujo continuo. Se produce una notable inhibicion en la actividad a1at en los tejidos de los organismos expuestos a cadmio