Estudio del polifosfato inorgánico en mastocitos y otras células de la sangre

Resumen

El polifosfato inorgánico (polyP), es un polímero lineal que contiene desde tres hasta cientos de residuos de ortofosfato, unidos por enlaces fosfoanhidro de alta energía similares a los encontrados en el ATP. Este compuesto se ha encontrado en muchos organismos, como bacterias, hongos, protozoos, plantas y animales, donde se ha relacionado con variadas e importantes funciones. En el presente trabajo estudiamos el polyP en mastocitos, así como en otras células sanguíneas, como son basófilos, trombocitos de pollo y células de mieloma múltiple. En mastocitos, el polyP se acumula en gránulos repartidos por el citoplasma, los cuales son electrón densos y contienen serotonina. Igualmente son capaces de acumular grandes cantidades de Ca2+ y son acídicos. Estas características hace de dichos gránulos muy similares a gránulos densos de plaquetas y a acidocalcisomas. Además, el polyP se libera junto a serotonina, y presumiblemente otros mediadores, cuando activamos los mastocitos con IgE. Por otra parte, el polyP de los mastocitos es capaz de estimular la generación de bradiquinina en plasma humano, por lo que podría jugar un papel importante en la vía de coagulación e inflamación. Los trombocitos son los análogos a las plaquetas en los pollos en funciones, pero existen dos diferencias principales: Contienen núcleo y carecen de FXII. Esto hace que sea interesante su estudio como método comparativo con humanos. Observamos presencia de polyP en el citoplasma de trombocitos, con predominio de polyP de cadena larga, a diferencia de lo observado en plaquetas. Esta diferencia de tamaño de polyP puede deberse a una adaptación en la activación de la vía de contacto, por la presencia o ausencia de FXII. Por último, se estudia el efecto de polyP en células de mieloma múltiple. En trabajos previos de nuestro grupo se observó una inducción a la apoptosis en células de mieloma. Mediante estudios de array, observamos variaciones en genes importantes en la supervivencia celular como egr1, fos, ccl-2 y tert. Por proteómica, se estudió la fosforilación en Tyr, encontrándose un descenso de fosforilación en p38 MAPK y CDK1 en células de Mieloma tratadas. Además, con el tratamiento conjunto polyP + bortezomib se conseguía un efecto aditivo en la apoptosis, proponiéndolo como un posible tratamiento. En adición a esto, se estudio el efecto de la ausencia de polyP en células de mieloma mediante transfección con un vector con la enzima exopolifosfatasa de levadura scPPX. No se observó diferencias en la liberación de IgE, transcripción ni migración celular, pero si en células tratadas con Sorbitol, un inductor de estrés osmótico celular. Esto sugiere un papel importante en el control osmótico de la célula por parte del polyP presente en el nucleolo.