Obtención, clonación, secuenciación y expresión de tropomiosina de Anisakisevaluación de su carácter alergénico

Laburpena

TROPMIOSINA DE ANISAKIS SIMPLEX Aunque la anisakiosis esta bien estudiada en países con dietas ricas en pescado crudo, la hipersensibilidad a anisakis, por ingestión de pescado parasitado, no esta lo suficientemente clarificado. Los camios gastronómicos en nuestra población, con incremento del consumo de pescado crudo así como la amplia parasitación observada en el pescado, nos hace pensar en un elevado interés, no solo investigador sino también sanitario, estudiando la patología y estandarizando el patrón inmunológico del proceso. OBJETIVOS 1,- Obtención y cualificación de métodos de obtención de larvas L3 de Anisakis simplex y proceso de preparación de extractos alergénicos y fracciones purificadas. 2,- Definición de antigenogramas y alergogramas de Anisakis simplex. 3,- Definición de la actividad biológica "in vivo" del extracto de Anisakis simplex. 4,- Definición de métodos de aislamiento e identificación de tropomiosina (Ani s3) de Anisakis simplex. 5,- Relevancia y contribución de la tropomiosina como alérgeno en pacientes sensiblizados a Anisakis simplex. 6,- Comportamiento inmunologico de la tropomiosina de Anisakis simplex, comparada con la de otras especies de invertebrados. Características panalergénicas y reactividad cruzada. 7,- Algoritmo clínico e inmunodiagnóstico en la presunta sensibilización a Anisakis simplex. MATERIAL Y MÉTODOS Realizaremos indentificación morfológica del parásito, posteriormente cuantificaremos proteínas y azúcares en nuestro liofilizado, análisis electroforético, cromatográfico y estudios in vivo (Prick Test). RESUMEN Hemos obtenido larvas de Anisakis simplex intentando evaluar un método de fuente alergénica y de fracción rica en Tropomiosina de Anisakis simplex, así como evaluar su actividad alergénica en base a la capacidad fijadora de IgE. El hecho de que exista sensibilizaciones subclínicas en pacientes con pruebas cután