Nuevos metodos de fijación y preservación de material biológico para la investigación espacial

  1. LERIA MOSQUERA, FRANCISCA
Supervised by:
  1. Francisco Javier Medina Díaz Director
  2. José María Lopez-Cepero Lopez-Cepero Co-director

Defence university: Universidad de Cádiz

Fecha de defensa: 13 July 2000

Committee:
  1. Roberto Marco-Cuellar Chair
  2. Mª Carmen Muñoz de Las Pascua Secretary
  3. Pedro Hernan Esponda Fernandez Committee member
  4. Jaime Renau Piqueras Committee member
  5. Antonio López Muñoz Committee member
Department:
  1. Anatomía Patológica, Biología Celular, Histología, Historia de la Ciencia, Medicina Legal y Forense y Toxicología

Type: Thesis

Teseo: 75089 DIALNET

Abstract

Se abrodan métodos de fijación basados en la tecnologia de las microondas. Se ha utilizado un horno de microondas especialmente modificado conel que se han conseguido fijaciones en las que la preservación estructural es equivalente a las obtenidas en las fijaciones convencionales irradiando las muestras durante 10 min a 900W, en pulsos de 37 sg separados por pausas de 7 sg(automático a 750 W). Se han empleado otros dispositivos de irradiación, los bancos de microondas, con potencias de 5 W, en los que las ondas son guiadas para atravesar la muestra obteniéndose resultados satisfactorios utilizando PFA al 4% o al 1% durante 20 min. Para la preservación de muestras biológicas se ha utilizado la tecnología del subenfriamiento con la que se consigue mantenerlas muestras por debajo de 0º C sin congelación gracias a su emulsión en una fase oleosa, transformándose en pequeñas gotitas que evitan la nucleacion del hielo. Esta técnica ha sido utilizada sobre muestras fijadas (nucleos aprotoplastos) que permanecieron solo enfriados de 1 a 6 semanas manteniendo sus características estructurales y antigénicas. Las experiencias llevadas a cabo sobre núcleos sin fijar demuestran que estos mantienen sus características estructurales, ultraestructurales, antigénicas y funcionales después del subenfriamiento.