Evaluación de un nuevo método para la detección de resistencia a Rifampicina e Isoniazida en M.Tuberculosis. Aplicación en muestras clínicas

Resumen

La tuberculosis, causada por el microorganismo Mycobacterium tuberculosis, es la enfermedad infecciosa que más muertes causa en la población adulta. El aumento en el número de nuevos casos en los países desarrollados se debe a factores como la infección por el Virus de la Inmunodeficiencia humana (VIH), la inmigracion desde países en los que la prevalencia de tuberculosis es elevada y problemas sociales como el aumento del número de las personas sin hogar. De forma simultánea a este fenómeno, se ha producido un aumento en el número de aislamientos de cepas de M.tuberculosis resistentes a rifampicina y/o isoniazida, ambos antimicrobianos de primera línea para el tratamiento de la enfermedad. El objetivo de la Tesis fue diseñar un nuevo método de PCR en tiempo real para la amplificación de ADN de M.tuberculosis, utilizando el sistema Light Cycler TM, que permite la detección genotípica de mutaciones que confieren resistencia a rifampicina e isoniazida en M. Tuberculosis en 30 minutos, sin necesidad de manipular el producto de amplificación tras la reacción. Si se comprueba esta hipótesis, se aplicará este método para la detección de mutaciones directamente en el ADN extraído de muestras clínicas de estos baciloscopia positiva, lo que permitiría reducir el tiempo de la determinación dela sensibilidad de 15-21 días por los métodos fenotípicos convencionales a 24 horas.