Identificación de factores inductores de la maduración y supervivencia de células plasmáticas autorreactivas y determinación de subpoblaciones linfoides b en lupus eritematoso sistémico y artritis reumatoide

Resumen

La artritis reumatoide (AR) y el Lupus eritematoso sistémico (LES) son enfermedades autoinmunes sistémicas caracterizadas por una respuesta autoinmune humoral patogénica no completamente conocida. El objetivo global del presente trabajo se centra en el estudio de la serie linfoide B autorreactiva (Linfocitos B (LB) y Células Secretoras de Anticuerpos (CSA)) en dos enfermedades autoinmunes sistémicas, el LES y la AR. El interés del estudio reside en la relevancia de dichas poblaciones en la patogenia de estas enfermedades, así como en el reconocimiento de que suponen importantes dianas terapéuticas. Hay que señalar que el conocimiento de los LBA y las CSA autorreactivas en el LES y la AR es limitado, fundamentalmente porque estas poblaciones son muy escasas (inferior al 1 % de la población mononuclear) y esto conlleva la dificultad de obtener un rendimiento suficiente para realizar estudios funcionales en muestras de pacientes. De este modo, gran parte de los hallazgos del presente estudio resultan novedosos. Las conclusiones derivadas de este estudio son las siguientes: • La quimioluminiscencia es una metodología sensible y específica para la detección de auto-Ac anti-ENA, anti-DNAds, y ACPA producidos en cultivos celulares de pacientes con LES y AR, respectivamente. • En pacientes con LES se detectan células secretoras de Ac anti-ENA y anti-DNAds circulantes en alrededor del 50% y del 30% de los casos, respectivamente. De modo similar, en el 36% de los pacientes con AR, se detectan CSA productoras de ACPA. • La mezcla de citoquinas específicas de nicho de CP (IL-6, IL-21, BAFF, APRIL, CXCL12) promueve la producción auto-Ac anti-ENA y antiDNAds por CSA circulantes. Este hecho se debe al aumento de la proliferación y disminución de la apoptosis de las CSA. • La producción de auto-Ac anti-ENA y anti-DNAds por CSA en cultivos estimulados con citoquinas de nicho de CP se inhibe al bloquear la vía JAK/STAT3, por lo que fármacos bloqueadores de esta vía podrían ser considerados nuevas opciones terapéuticas en el LES. • La presencia en la circulación de CSA específicas productoras de Ac anti-DNAds parece ser un factor de peor pronóstico, ya que los pacientes con estas células en la sangre muestran marcadores de actividad y de daño orgánico más altos. • La inmunoselección mediante inmunobeads magnéticas acopladas a ENA y ACPA es un método adecuado para purificar linfocitos B autorreactivos específicos para ENA y péptidos citrulinados de pacientes con LES y AR, respectivamente. • Una fracción significativa de LBA está constituida por LB naïve activados, con escaso número de mutaciones somáticas y sin cambio de isotipo. Los LBA con marcadores de LB de memoria y con un alto nivel de mutaciones somáticas representan un porcentaje menor. • Los LBA se diferencian a CSA en presencia de estímulos Tindependientes y T-dependientes, siendo mayor el efecto con estos últimos debido a la participación de la vía CD40-CD40L. En ambos casos, la estimulación induce la activación de los linfocitos B y su diferenciación. • Los LBA-ENA y los LBA-ACPA recirculan en alrededor del 75% y 66% de los pacientes con LES y AR, respectivamente, y, en dichos pacientes la producción de auto-Ac séricos es mayor. • Los pacientes con AR, al igual que se ha demostrado en pacientes con LES, presentan una disminución de la subpoblación de LB non-switched CD19+CD27+IgD+. Además, aquellos con LBA-ACPA circulantes muestran niveles más disminuidos de esta subpoblación. • La presencia en sangre de LBA y/o CSA indica que la producción de Ac en suero podría depender tanto de CSA autorreactivas como de la activación y diferenciación de LBA. Este hecho podría condicionar el tipo de tratamiento, en función de la predominancia de un tipo celular u otro.