Selección molecular in vitro como base para el diseño de RNAs inhibidores frente a la región IRES de HCV

Résumé

Existen múltiples enfermedades virales para las que aún no existen terapias efectivas. Por ello se hace necesario el desarrollo de tratamientos alternativos que permitan combatir de una manera eficiente a estos patógenos, y en su caso, que sean insensibles a la adquisición de resistencia por parte del agente viral. El principal objetivo de la Tesis Doctoral presentada ha consistido en el desarrollo de nuevos RNAs inhibidores basados en ribozimas. Como modelo frente al cual dirigir el diseño se ha elegido el genoma del virus causante de la Hepatitis tipo C. El descubrimiento de moléculas de RNA con capacidad catalítica (conocidas como ribozimas) se remonta a principios de 1980. La mayoría de las ribozimas presentes en la naturaleza catalizan el corte y/o ligación de una molécula de RNA. Entre las múltiples características de las ribozimas destaca que son altamente específicas y selectivas de la molécula de sustrato que procesan, por lo que desde su descubrimiento se perfilaron como unos excelentes candidatos para ser utilizados como agentes terapéuticos. Hasta la fecha las ribozimas han sido ampliamente utilizadas para la inactivación específica de RNAs virales o celulares, implicados en la generación de diversas patologías, como SIDA o diversos procesos tumorales. En algunos casos la tecnología de ribozimas ha sido ensayada clínicamente. Sin embargo, aún existen una serie de factores que limitan su empleo, entre los que destacan la estabilidad del inhibidor y su asociación eficaz al RNA sustrato. Se requiere que esta unión sea lo suficientemente estable, rápida y efectiva como para que la diana sea procesada activamente por el dominio catalítico. El trabajo presentado en la Tesis Doctoral ha consistido en el desarrollo de ribozimas dirigidas frente al agente etiológico de la hepatitis tipo C (HCV). Uno de los principales escollos a solventar en el diseño de agentes anti-HCV es la alta capacidad para evadir la respuesta in