Investigación bioquímica y aproximación proteómica de fluidos biológicos en muertes por sumersión

Resumen

En el mundo han aumentado las muertes por sumersión llegando a ser la segunda causa de muerte no intencional. Su diagnóstico en patología forense es un reto en la práctica diaria ya que la ausencia de prueba diagnóstica específica y absolutamente fiable provoca la necesidad de realización de exámenes complementarios a la autopsia médico-legal, tales como investigaciones histopatológicas, biológicas y bioquímicas para identificar la causa de la muerte, por las implicaciones judiciales que se presentan. Los avances en la investigación del análisis de elementos trazan en fluidos biológicos y en medio de sumersión y el estudio de proteínas con expresión diferencial en muertes por sumersión contribuirían al diagnóstico postmortem de sumersión. Los objetivos fueron analizar concentraciones de elementos traza en sangre y en humor vítreo en casos de sumersión y otras causas de muerte, así como investigar por primera vez el perfil proteómico de casos de sumersión para mejorar el conocimiento de su fisiopatología y su posible aplicación en el diagnóstico y tratamiento en casos de supervivencia. Material y métodos: La muestra estuvo formada por 137 cadáveres (n=111 casos de sumersión y n=26 casos de otras causas de muerte) cuyas autopsias se realizaron en el Instituto de Medicina Legal y Ciencias forenses de España. La edad media de los sujetos fue 48,58 años y el intervalo postmortem medio 27,87 horas. De cada caso se obtuvieron muestras de sangre de ambos ventrículos y periférica y humor vítreo. En los casos de sumersión se recogió agua del lugar de los hechos. En cada muestra se analizaron litio, potasio, magnesio, bromo, boro, calcio y estroncio mediante las técnicas ICP-MS. Para el análisis proteómico, mediante la aplicación de tecnologías basadas en la Espectrometría de Masas, identificamos proteínas de expresión que pudieran actuar como potenciales biomarcadores en el diagnóstico postmortem de sumersión. Realizamos un experimento proteómico piloto con inclusión de dos ahogados y dos casos forenses de control, validado en 25 casos, con determinación de apolipoproteína A y ?-1 antitripsina. Resultados: El análisis de diferencias de concentraciones de elementos en sangre reveló mayores concentraciones en muertes por sumersión que en otras causas de muerte salvo en el caso de potasio, junto a concentraciones más elevadas a nivel de ventrículo izquierdo. Las concentraciones de todos los elementos en humor vítreo fueron significativamente superiores en sumersión, salvo para el calcio. En los casos de sumersión hallamos correlaciones estadísticamente significativas entre concentraciones de elementos en sangre, humor vítreo y agua para el litio, calcio y estroncio. No encontramos correlaciones significativas entre el intervalo postmortem y elementos traza en sangre ni humor vítreo en muertes por sumersión. En el análisis de las curvas ROC en sangre la mayor capacidad discriminante se halló para las concentraciones de estroncio, litio y magnesio, mientras que en humor vítreo se halló para las concentraciones de estroncio, litio, boro, bromo y magnesio. El análisis multivariante reveló concentraciones de estroncio y bromo en ventrículo izquierdo y boro en sangre periférica como factores predictivos en la muerte por sumersión, mientras que en humor vítreo el bromo se reveló como primer factor asociado a la muerte por sumersión. Tanto apolipoproteína A1 como ?-1 antitripsina son factores predictivos independientes de muertes por sumersión. Evidenciamos correlaciones significativas entre concentraciones de elementos en sangre y humor vítreo. El estudio piloto proteómico revela que tanto apolipoproteína A1 como ?-1 antitripsina son factores predictivos independientes de muertes por sumersión. Conclusiones: La determinación conjunta de elementos traza en sangre y humor vítreo junto a la determinación proteómica de apolipoproteína A1 y ?-1 antitripsina contribuiría como pruebas complementarias al diagnóstico de muertes por sumersión en agua salada.