Aproximaciones biotecnológicas a modelos tumorales

Resumen

Para la lucha contra los tumores es necesario desarrollar nuevas terapias, muchas de las cuales estarán basadas en medicamentos biotecnológicos y modelos tumorales que permitan evaluar su eficacia. Los modelos tumorales en ratón han supuesto una herramienta de valor incalculable para el desarrollo de nuevos fármacos en oncología, pero en la mayoría de los casos, la evaluación de la evolución de dichos tumores se ha venido realizando simplemente mediante la medida del tamaño tumoral con un calibre. El desarrollo de modelos tumorales basados en el uso de líneas celulares que expresan proteínas fluorescentes, ha supuesto una importante revolución, pero el hecho de que las células ya expresen una proteína determinada, limita la flexibilidad de la técnica. En este trabajo desarrollamos la prueba de concepto de una técnica biotecnológica, basada en la expresión en la membrana de las células tumorales, de una molécula que pueda ser detectada con muy alta afinidad por un ligando inyectado con posterioridad al desarrollo tumoral y que pueda estar marcado, no sólo por medios fluorescentes con distintas emisiones, sino también por medios magnéticos o con moléculas de alto peso molecular, que permita su detección mediante resonancia magnética de imagen (RMN) o tomografía axial computerizada (TAC), para las que también hemos desarrollado y caracterizado nanopartículas biocompatibles de oro. Esta técnica permitirá, no sólo un método de detección flexible, sino también una detección que no sólo detecta el crecimiento tumoral en base a la intensidad de una fluorescencia, sino un marcaje “de novo”, de las células que se han desarrollado con posterioridad a la inyección del nuevo marcador. También en este trabajo, desarrollamos una prueba de concepto para la mejora de la técnica de selección de clones hipersecretores que podrá aplicarse a la producción de medicamentos biotecnológicos. En la mayoría de los casos, la selección de clones hipersecretores se sigue haciendo mediante dilución límite (una técnica poco eficiente y difícil de automatizar) y más recientemente mediante instrumentos de alto coste económicos, disponible sólo en algunos laboratorios y que además no se puede utilizar para todos los tipos celulares. En este trabajo, hemos expresado una molécula en la membrana de las células productoras, que permitirá capturar las moléculas secretadas por cada célula, identificando de ese modo su nivel de secreción, mediante citometría de flujo analítica y seleccionando las células de interés, mediante citometría de flujo preparativa, instrumentos accesibles para la mayoría de laboratorios.